شناسایی جدایه های نکروتوکسیژنیک اشریشیاکلی روی لاشه گوسفند و بز

سویه های اشریشیاکلی نکروتوکسیژنیک (ntec) یکی از مهمترین پاتوتیپ های بیماری زای روده ای محسوب می گردند. سویه های نکروتوکسیژنیک دارای دو تیپ ntec1 و ntec2 می باشند که واجد عوامل حدت متعددی از قبیل فیمبریه، آدزین های غیرفیمبریه، توکسین های فاکتور سیتوتوکسیک نکروز دهنده((cnf و توکسین تورم دهنده کشنده سلول(cdt) هستند. هدف از انجام این مطالعه شناسایی جدایه های نکروتوکسیژنیک اشریشیاکلی و تعیین فراوانی آنها روی لاشه گوسفند و بز می باشد. در این مطالعه از 100 لاشه گوسفند و بز در کشتارگاه صنعتی کرمان نمونه گیری شد. جهت غنی سازی، نمونه ها در آزمایشگاه کنترل کیفی در محیط لاکتوزمک کانکی براث کشت داده شدند. روش کشت خطی در محیط مک کانکی آگار جهت جداسازی باکتری اشریشیاکلی صورت پذیرفت آزمایشات بیوشیمیایی به منظور تأیید نهایی باکتری اشریشیاکلی انجام شد. در نهایت از هر نمونه 2 تا3 کلنی تأیید شده، در محیط لوریا برتانی به همراه 30 درصد گلیسرول در دمای 20- درجه سانتی گراد ذخیره گردید. به منظور شناسایی جدایه های مثبت از نظر ژن های خانواده cnf وcdtآزمایش m-pcr صورت پذیرفت. از مجموع 420 کلنی به دست آمده پس از آزمایشات متعدد 374 جدایه اشریشیاکلی شناسایی گردید در آزمایش pcr مرحله اول، 2 جدایه دارای باند 466 جفت بازی ژن cdtبودند و یکی از جدایه ها علاوه بر ژن cdtواجد ژن cnfبا وزن 1150 جفت باز بود. بر اساس نتایج pcr مرحله دوم جهت شناسایی واریانت ها، هیچیک از جدایه ها از نظر ژن هایcnf2 , cnf1, cdtiii , cdtiv مثبت نبودند.